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牛主要組織相容性復合體ELISA試劑盒操作步驟

2019-07-31
  1、取出試劑盒,放置于室溫20度25度)30分鐘。

  2、分組:取出96口井板,根據待測樣品數和標準產品數確定所需條帶,繼續對剩余板條進行冷藏,并分別建立標準產品組(6個濃度)、空白孔和待測樣品組。

  注:為減小實驗誤差,保證精度,建議設置復合孔。

  3、樣品添加:按標準產品的順序,在空白微孔中加入100μl標準溶液,在空白對照孔中加入100μl蒸餾水,在其它微孔中加入100μl標準溶液。

  4、酶標準溶液:在標準產品組和待測樣品組(空白對照孔除外)的每個孔中加入50μl酶標準溶液。

  5、培養:酶標板用密封紙密封后,用37℃在濕箱中孵育1小時。

  6、洗衣板:將稀釋后的洗滌劑灌滿每個孔,設定15次30秒30,將酶標板洗5次,用吸水紙徹底沖洗干。

  7、顯色:在每個孔加入顯色劑A液50μl后,再加入顯色劑B液50μl。

  8、終止:在25℃-37℃時,避光反應為10 min 15 min,加入50μl終止液。

  9、讀寫板:在波長450 nm處讀出每個孔的O值。

  注:在讀取極板時,應將盤子底部殘留的液體和指印烘干,并應在反應結束后30分鐘內控制讀數時間,以免影響準確度。




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